规格/价格
10ml/48 30ml/98 100ml/208
使用说明
1.5000g离心10分钟收集细菌,去上清液。将细菌悬浮于PBS,再次离心,弃PBS。
2.按湿菌体(g):裂解液(ml)=1:10-1:50的比例,将细菌团悬浮于相应体积的裂解液中,室温裂解30-60分钟, 期间不断的振荡混匀。
3.如有超声器,可将细菌进行多次最高频率的短促冲击(每次10-30秒,重复4次,功率以不产生泡沫为准),在每次超声处理之间,将细菌再置于冰水内降温。
4.16000g,离心10分钟。
5.仔细吸取上清,盛于另一离心管,置冰上备用。
6.上清液即为蛋白提取物,可以用于下一步的蛋白定量和蛋白的分析。
注意:如果大部分过表达的蛋白质残留在沉淀中,目标蛋白质可能在包涵体中表达。使用包涵体增溶试剂或改变表达条件以最小化包涵体形成。
文献引用格式
细菌总蛋白抽提试剂 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR0157)