微量BCA蛋白质定量试剂盒

Kit/300

溶液 A 100ml 溶液 B 100ml 溶液 C 5ml 蛋白标准品 20ml（2mg/ml）

室温保存，一年有效。

标准品以及工作液的制备： A. 牛血清白蛋白标准品稀释液的制备 管号 稀释液体积 BSA标准品体积 终浓度 A 980ul 20ul (标准品原液中取) 40 μg/ml B 400ul 400ul (从A管取) 20 μg/ml C 400ul 400ul (从B管取) 10 μg/ml D 400ul 400ul (从C管取) 5 μg/ml E 400ul 400ul (从D管取) 2.5 μg/ml F 600ul 400ul (从E管取) 1 μg/ml G 400ul 400ul (从F管取) 0.5 μg/ml H 800ul 0 0 μg/ml(空白孔) 注意：上表适用于微孔板法的标准品稀释，试管法的标准品稀释可按照具体使用量进行比例扩大。 B. 微量BCA工作液的制备 1.使用下列公式计算出所需工作液的总体积： (标准孔数 +待测样品孔数) × (重复数) × (每个样品孔的工作液体积) = 所需工作液的总体积 例如: 标准的试管测定每个样品需要3个不同的稀释度和2次重复(8个标准孔 + 3个待测样品孔) × (2重复) × (1 ml) = 22 ml BCA工作液 (可以多配到25 ml)。 注意：在试管检测法中，每个样品需要1ml的工作液，在微孔板检测中，每个样品需要150μl的工作液。 2. 配制 BCA 工作液： 先将溶液A、溶液B 和溶液C 按50：48：2 的比例混合，所得溶液即BCA 工作液。比如：5 ml 溶液A + 4.8 mL 溶液B +200ul溶液C。 注意：试剂C刚加入到试剂A和试剂B中时，会产生浑浊并迅速消失呈清绿色溶液。制备足够体积的工作液以检测相应数量的样品。 使用方法： 一：微孔板测定法 1.吸取150μl的标准品及未知样品分别至微孔板中。 2.滴加150μl的工作液到每孔中并充分混合30秒。 3.盖上微孔板并在37℃孵育2小时或60℃放置1小时。 4.微孔板冷却至室温。 5.10分钟内在酶标仪上测量562nm时的吸光值。注意：冷却至室温后依然会继续显色。但是，在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值一般都不会有太大影响。 6.绘制标准曲线，测量样品的浓度。 二：试管测定法 1.吸取1.0ml的标准品及未知样品分别至对应标记的检测管中。 2.滴加1.0ml的工作液至每管中并充分混合。 3.盖上检测管并于60℃水浴孵育1个小时。 4.所有试管冷却至室温。 5.10分钟内在分光光度计上测量562nm时的吸光值。注意：冷却至室温后依然会继续显色。但是，在室温时的显色比例已经很低，在10分钟内检测到的吸收值一般都不会有太大影响。 6.绘制标准曲线，测量样品的浓度。

微量BCA蛋白质定量试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#AR1110)