产品名称
Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)
产品介绍
Cell Counting Kit-8(简称 CCK-8)试剂盒广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高
灵敏度检测,它对细胞无明显毒性,在电子载体的作用下被细胞线粒体中的一些脱氢酶
还原生成橙黄色的 formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色
越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有 WST-8 的 CCK-8 溶液,无
须再进行任何配制等操作。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块 96 孔板内完成。
不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解 formazan。可以用于大批量
样品的检测。
注意事项
1.第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养
时间。
2.接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不
一致。
3.培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加
培养基。
4.建议采用多通道移液器,减少平行孔间的误差,加 CCK-8 时,建议斜贴着培养板壁
加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰 OD 值。
5.若细胞培养时间较长,培养基颜色或 PH 发生变化,建议更换培养基后再加 CCK-8,含有酚红的培养基不影响测定。
6.CCK-8 对细胞的毒性非常低,其他的实验,例如中性红法或结晶紫法,也可在 CCK-8
法检测完后继续进行。
7.可以使用大于 600nm 的波长,例如 650nm,作为参考波长进行双波长测定,CCK-8 在
参比波长处没有吸光值,设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。
8.如果实验中待测物质有氧化还原剂,在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入
CCK-8 试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较(只加 CCK-8 试剂),如果 O.D
值明显偏高,则说明有反应。
9.加 CCK-8 试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入 CCK-8 试剂后轻轻震培
养板,为了避免加样时由于 CCK-8 残留在枪头上所带来的误差,可以在加样前用培养稀释
CCK-8 试剂并混匀后加样。
10.CCK-8 反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。