地高辛随机引物DNA标记复合物

Dig Random Labeling Mix

说明书

MK1001

25μl ￥1180
货期：现货

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产品名称

地高辛随机引物DNA标记复合物

规格/价格

25μl/1180

试剂盒内容

DIG Random Labeling Mix(高效) 25μl

产品用途

该试剂盒用于DNA探针的随机引物标记;

使用说明

一：随机引物标记操作程序如下：
①用灭菌去离子蒸馏水稀释1μg DNA 至总体积16μl。
②DNA 热变性：把DNA 瓶置于沸水中，水浴10 分钟。然后，迅速地插入碎冰中3 分钟以上。
③加4μl DIG Random Labeling Mix(高效),混匀后再离心2000/r.p.m×5 分钟。
④置37℃反应至少120 分钟。时间越长，产量越高。延长反应时间至20 小时可明显增加地高辛标记DNA 的产量。应根据需要控制反应时间。
⑤加入2μ1 10mM EDTA 以中止反应，对于原位杂交和膜上杂交反应来说，标记反应可告结束，上述反应液置-20℃保存至少一年以上。且可反复使用。可根据下表估计标记产量： DNA 模板量标记一小时标记二十小时 10ng 45ng 600ng 30ng 130ng 1050ng 100ng 270ng 1500ng 300ng 450ng 2000ng 1000ng 850ng 2300ng 3000ng 1350ng 2650ng

注意事项

核酸探针的标记及杂交是一个很复杂的过程，步骤多耗时长，影响因素多。要想获得理想结果，每一步都应严格操作。下面几个问题尤其应予注意：
无菌操作：标记和杂交的各种溶液应高压灭菌；
含SDS, Tween20 的溶液应在滤膜除菌后加入其它溶液,使用灭菌吸头。
使用干净平皿: 每次用前必须严格清洗；膜的操作：操作膜时戴无尘的手套；只用无齿镊操作膜的边缘。原位杂交：每步反应均应加盖硅化的盖玻片；