产品名称
浓缩型SABC-FITC(人IgG)试剂盒
规格/价格
1/4盒(可以做400张左右的切片)/420元
1/2盒(可以做800张左右的切片)/750元
1盒(可以做1600张左右的切片)/1400元
产品介绍
SABC是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存,敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统,能明显提高敏感性及降低背景。FITC在490-495nm激化,在520-530nm发射荧光,呈黄绿色。
试剂盒内容
试剂盒组分 | 体积 | 稀释比 | 用途 | 保存条件 |
正常浓缩兔血清 | 1ml/2ml/5ml | 1:10 | 用于组织切片的封闭 | 4℃可保存一年,应避免冷冻。 |
生物素标记兔抗人 IgG | 0.1ml/0.2ml/0.5ml | 1:100-200 | 生物素标记兔抗人 IgG |
SABC-FITC | 0.1ml/0.2ml/0.5ml | 1:100-200 | SABC-FITC 荧光染料 |
注:另有三个滴瓶供稀释试剂用。 |
需要自备的试剂
1.粘片剂APES或POLY-L-LYSINE(博士德公司有售)。
2.EDTA修复液(博士德公司有售)。
3.0.02MPBS(pH7.2-7.6)配法:1000ml蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O7g,NaH2PO4·2H2O0.5g。
4.0.01M枸橼酸盐缓冲液:1000ml蒸馏水中加枸橼酸三钠(C6H5Na3O7·2H2O)3g,枸橼酸(C6H8O7·H2O)0.4g。
使用说明
石蜡切片染色程序:
1.载玻片防脱片剂处理:可选择APES或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片紧密粘附。
2.切片脱蜡至水。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
4.滴加0.01MPBS1:10稀释的正常血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体,不洗。
5.滴加0.01MPBS适当稀释的一抗,20-37℃1~2小时或4℃过夜。0.01MPBS洗2分钟×3次。
6.滴加0.01MPBS1:100稀释的和一抗相对应的生物素化二抗,20-37℃30分钟。0.01MPBS洗2分钟×3次。
7.滴加0.01MPBS1:200-800稀释的DyLight488-SABC,20-37℃30分钟。0.01MPBS洗5分钟×4次。
8.水溶性封片剂封片。荧光显微镜观察。
血涂片,细胞和冰冻切片染色程序:
1.载玻片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine)。抗凝血经分层离心后涂片;培养细胞也可涂片或贴片生长;冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案首选4%多聚甲醛或10%福尔马林固定60-90分钟。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
其余步骤和石蜡切片4-8步相同。
文献引用格式
浓缩型SABC-FITC(人IgG)试剂盒 (Boster Biological Technology, Wuhan, China. Catalog#SA1068)